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案例說明
木蝴蝶配方顆粒試樣經(jīng)50%甲醇溶液超聲提取后，采用梯度洗脫，在276nm處用紫外檢測器檢測。木蝴蝶配方顆粒應呈現(xiàn)6個特征峰。
分析條件
色譜柱：Kromasil EternityXT-5-C18，4.6x250mm （訂貨號：X05CLA25）
流動相：（A）乙腈 （B）0.2%醋酸溶液
按下表進行梯度洗脫：
時間/min | 流動相A（%） | 流動相B（%） |
0 | 12 | 88 |
5 | 17 | 83 |
30 | 28 | 72 |
55 | 90 | 10 |
60 | 100 | 0 |
流速：0.8mL/min
進樣量：5μL
柱溫：25℃
波長：276nm
分析圖譜
依據(jù)上述色譜條件，分別將參照物溶液與供試品溶液注入液相色譜儀進行測定。參照物溶液的色譜圖如圖1所示，色譜圖積分結(jié)果見表1
表1 參照物溶液色譜圖積分結(jié)果
目標物 | 保留時間 | 峰面積 | 峰高 | 理論塔板數(shù) | 分離度 | 對稱/拖尾因子 |
(S)木蝴蝶苷B | 22.017 | 1246.602 | 109.209 | 88079 | - | 1.09 |
黃芩苷 | 27.258 | 1942.420 | 154.767 | 114402 | 16.94 | 1.22 |
黃芩素 | 42.025 | 3238.073 | 479.282 | 969814 | 59.91 | 1.17 |
由表1中數(shù)據(jù)可知，木蝴蝶苷B的理論塔板數(shù)為88079，滿足《木蝴蝶配方顆?！分幸?guī)定的不低于5000的要求。
供試品溶液的色譜圖如圖2所示，色譜圖積分結(jié)果見表2，特征峰相對保留時間結(jié)果見表3
表2 供試品溶液色譜圖積分結(jié)果
目標物 | 保留時間 | 峰面積 | 峰高 | 理論塔板數(shù) | 分離度 | 對稱/拖尾因子 | |
1(S):木蝴蝶苷B | 22.075 | 2874.583 | 253.552 | 88626 | - | 1.06 | |
2:黃芩苷 | 27.358 | 892.094 | 70.761 | 116014 | 17.11 | 1.20 | |
3 | 29.242 | 3709.902 | 299.830 | 132348 | 5.86 | 1.04 | |
4 | 34.292 | 485.051 | 36.283 | 156500 | 15.12 | 1.13 | |
5:黃芩素 | 42.058 | 1154.274 | 170.798 | 963689 | 29.99 | 1.15 | |
6 | 47.000 |
| 59.950 | 1088085 | 28.12 | 1.12 |
表3 特征峰相對保留時間結(jié)果表
目標物 | 保留時間 | 相對保留時間測定值 | 相對保留時間規(guī)定值 | 偏差 |
1(S):木蝴蝶苷B | 22.075 | - | - | - |
2:黃芩苷 | 27.358 | 1.24 | 1.26 | -1.59 |
3 | 29.242 | 1.32 | 1.34 | -1.49 |
4 | 34.292 | 1.55 | 1.60 | -3.13 |
5:黃芩素 | 42.058 | 1.91 | 2.06 | -7.28 |
6 | 47.000 | 2.13 | 2.30 | -7.39 |
由表2和表3中數(shù)據(jù)可知，木蝴蝶配方顆粒供試品溶液的特征峰個數(shù)為6個，與《木蝴蝶配方顆?！分幸?guī)定的特征峰個數(shù)一致；峰2、峰3、峰4、峰5、峰6與S峰的相對保留時間分別為1.24、1.32、1.55、1.91和2.13，均在規(guī)定值的
±8%以內(nèi)。
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